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訪問(wèn)量:107
更新時(shí)間:2024-11-05
豬前脂肪細(xì)胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
脂肪組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7013 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
豬前脂肪分離自脂肪組織;脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成,聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉;貯存的脂肪,在需要時(shí)可迅速分解成甘油和脂肪酸,經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動(dòng)及炎癥反應(yīng),參與多種重要病理生理過(guò)程;脂肪組織已由過(guò)去單純作為能量?jī)?chǔ)存的器官而成為一個(gè)極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪組織在體內(nèi)含有兩種主要的細(xì)胞:一種是在胞漿內(nèi)積聚脂滴的成熟脂肪細(xì)胞;另一種是雖未在胞漿內(nèi)積聚脂滴但有這種潛能的前脂肪細(xì)胞。前脂肪細(xì)胞呈梭形,有分裂和增殖的能力;成熟的脂肪細(xì)胞呈圓形,已經(jīng)失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪細(xì)胞是一類具有增殖和向脂肪細(xì)胞分化能力的特異化前體細(xì)胞,與肥胖有著非常密切的關(guān)系。前脂肪細(xì)胞是一種類成纖維細(xì)胞,在演變的過(guò)程中不斷吸收脂質(zhì),最終成為成熟的脂肪細(xì)胞。前脂肪細(xì)胞對(duì)外界機(jī)械損傷的抵抗力較強(qiáng),可望成為軟組織缺損的有益填充物。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的豬前脂肪采用膠原酶消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的豬前脂肪經(jīng)油紅O染色檢測(cè),純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
細(xì)小病毒(PPV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
細(xì)小病毒(PPV)核酸試劑盒 48T
偽狂犬病毒(PRV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
偽狂犬病毒(PRV)核酸試劑盒 48T
小鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA 試劑盒
Rat visceral adipose specific serine protease inhibitor (vaspin) ELISA Kit 大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白酶抑制劑(vaspin)試劑盒
Humanvasopeptidaseinhibitors,VPIELISAKit 人血管活性肽酶抑制劑(VPI)試劑盒 進(jìn)口分裝
HumanAquaporin2,AQP-2試劑盒人水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒
植物乙酰乙酰轉(zhuǎn)移酶(ACAT)活性熒光定量試劑盒20次
Humaissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISAKit人組織因子途徑抑制物(TFPI)試劑盒
p53依賴細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)蛋白抗體
琥珀酸脫氫酶的組合因子1抗體
SDC1重組大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 蛋白 Protein
Fe65 protein peptide Fe65 蛋白(多肽抗原 0.5mgFe65 protein peptide Fe65 蛋白(多肽抗原)
TXN2重組人 Thioredoxin-2 / TXN2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (His 標(biāo)簽)
EFNA4 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白
Fe65 protein peptide Fe65 蛋白(多肽抗原 0.5mgFe65 protein peptide Fe65 蛋白(多肽抗原)
FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (His 標(biāo)簽)
SDC1重組大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 蛋白 Protein
EFNA4 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白
TXN2重組人 Thioredoxin-2 / TXN2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
豬前脂肪細(xì)胞大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)試劑盒 ,英文名: hs-CRP ELISA Kit
Mouse FMS like tyrosine kinase 3 (Flt3) ELISA Kit 小鼠FMS樣酪激酶3(Flt3)試劑盒
ELISA 小鼠心肌鈣蛋白T(mouse c) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLDL(Humanlowdensitylipoprotein)ELISAKit人低密度脂蛋白
通用型LB細(xì)菌培養(yǎng)液500毫升
ELISAKitLMA猴抗肝細(xì)胞膜抗體