服務(wù)熱線
021-59989018
歡迎訪問上海研生實業(yè)有限公司網(wǎng)站
全國統(tǒng)一服務(wù)熱線：
15201736385
產(chǎn)品中心您當(dāng)前的位置：首頁 > 產(chǎn)品中心 > 原代細胞 > 兔原代細胞 > 兔支氣管平滑肌細胞
基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
兔支氣管平滑肌細胞
產(chǎn)品簡介：
兔支氣管平滑肌細胞公司正在出售的產(chǎn)品：酪蛋白激酶Ⅱβ亞基抗體 遠端上游元件結(jié)合蛋白3抗體 腫瘤/睪丸抗原11.2抗體 兔椎間盤纖維環(huán)細胞 人肺大靜脈平滑肌細胞 MES-SA人子宮癌細胞 ES-2 (人卵巢透明細胞癌細胞)
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：61
更新時間：2024-11-04
產(chǎn)品特性Product characteristics
兔支氣管平滑肌細胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
支氣管 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7769 |
細胞簡介：
兔支氣管平滑肌分離自支氣管組織；支氣管（Bronchi），是指由支氣管分出的各級分枝，由支氣管分出的一級支氣管，即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較，前者較細長，走向傾斜；后者較粗短，走向較前者略直，所以經(jīng)支氣管墮入的異物多進入右主支氣管。支氣管和支氣管還有以區(qū)別就是，支氣管是以“C"型的支氣管軟骨為支架，而支氣管不是。支氣管平滑肌細胞主要功能：①支氣管平滑肌細胞能維持支氣管張力，保持支氣管形態(tài)；②支氣管平滑肌特異的超微結(jié)構(gòu)特點和調(diào)節(jié)機制是支氣管正常生理功能的基礎(chǔ)；③支氣管平滑肌通過分泌細胞因子和趨化因子等促炎介質(zhì)，發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能。支氣管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
實驗室分離的兔支氣管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的兔支氣管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔支氣管平滑肌體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
豬補體蛋白3(C3)ELISAKit ELISA.
豬骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)ELISAKit ELISA.
豬上腺素(EPI)ELISAKit ELISA.
豬脂蛋白α(Lp-α)ELISAKit ELISA.
豬(T)ELISA 試劑盒
Human haptoglobin / haptoglobin (Hpt/HP) ELISA Kit 人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)試劑盒
PorcineHeatShockProtein70,HSP-70ELISAKit 豬熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAlpha-FodrinIgG/IgAELISAKit大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA
血液精(arginine)含量化學(xué)比色法定量試劑盒20次
phytohaemagglinin,PHAELISAKit植物血凝素(PHA)試劑盒
EB病毒核抗原-3B抗體
受體輔助蛋白1抗體
FCGR1重組大鼠 CD64 / FCGR1A 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
HIV-1(human immunodeficiency virus type 1 0.5mgHIV-1(human immunodeficiency virus type 1) 艾滋病病毒-1/人類免疫缺陷病毒1型(抗原)
SCGN重組人 SCGN / Secretagogin 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ANGPT4 Protein Human 重組人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IFNG Protein Mouse 重組小鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白
HIV-1(human immunodeficiency virus type 1 0.5mgHIV-1(human immunodeficiency virus type 1) 艾滋病病毒-1/人類免疫缺陷病毒1型(抗原)
ANGPT4 Protein Human 重組人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
FCGR1重組大鼠 CD64 / FCGR1A 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
IFNG Protein Mouse 重組小鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白
SCGN重組人 SCGN / Secretagogin 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
兔支氣管平滑肌細胞大鼠肌鈣蛋白I(TNI)試劑盒 ，英文名： TNI ELISA Kit
Rat 17 hydroxycoicosteroids (17-OHCS) ELISA Kit 大鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)試劑盒
RatCollagenaseIELISAKit 大鼠膠原酶I(CollagenaseI)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforET-1(HumanEndothelin1)ELISAKit人內(nèi)皮素1
細胞亮(leucine)含量比色法定量試劑盒20次
Ratmaixmetalloproteinase1,MMP-1ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)試劑盒
