產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品型號：

廠商性質：經(jīng)銷商

訪問量：669

更新時間：2024-11-05

本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！

產(chǎn)品名稱：兔結腸黏膜上皮細胞

組織來源：結腸

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔結腸黏膜上皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細胞簡介：

兔結腸黏膜上皮分離自結腸組織；結腸在右髂窩內續(xù)于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部分，大部分固定于腹后壁，結腸的排列酷似英文字母“M"，將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為：黏膜（上皮層、固有層、黏膜肌層），黏膜下層（疏松結締組織），肌層（內環(huán)形、外縱行兩層平滑肌），外膜（纖維膜或漿膜）。腸黏膜上皮細胞是機體內外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機體面對病原微生物的道防線。因此，腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞，在黏膜免疫反應的起始階段發(fā)揮關鍵作用，它決定黏膜免疫反應的發(fā)生、性質和強度。探討正常結腸黏膜上皮細胞的分離、體外培養(yǎng)方法，為研究腸黏膜上皮細胞以及與腸黏膜相關疾病建立合適的細胞模型。

方法簡介：

實驗室分離的兔結腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

實驗室分離的兔結腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠核因子κB受體活化因子配基試劑盒   小鼠核因子κB受體活化因子配基試劑盒      小鼠核因子κB受體活化因子配基試劑盒，，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠核因子κB受體活化因子配基試劑盒、小鼠核因子κB受體活化因子配基eisa試劑盒

小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體試劑盒   小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體試劑盒      小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體試劑盒，，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體試劑盒、小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體eisa試劑盒

小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體試劑盒   小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體試劑盒      小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體試劑盒，，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體試劑盒、小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體eisa試劑盒

小鼠甲種胎兒球蛋白試劑盒   小鼠甲種胎兒球蛋白試劑盒      小鼠甲種胎兒球蛋白試劑盒，，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠甲種胎兒球蛋白試劑盒、小鼠甲種胎兒球蛋白eisa試劑盒

G蛋白偶聯(lián)受體GPR89A蛋白抗體

肌動蛋白結合蛋白Girdin抗體

IL17RA重組小鼠 IL17RA / IL17R / CD217 蛋白 Protein

AGEs control article(advanced glycosylation end products control article 50mgAGEs control article(advanced glycosylation end products control article) 晚期糖基化終末產(chǎn)物蛋白對照品

NT5C3A重組人 NT5C3 蛋白 Protein

DMP1 Protein Huma僀?僀

AGEs control article(advanced glycosylation end products control article 50mgAGEs control article(advanced glycosylation end products control article) 晚期糖基化終末產(chǎn)物蛋白對照品

DMP1 Protein Human 重組人 DMP1 蛋白

IL17RA重組小鼠 IL17RA / IL17R / CD217 蛋白 Protein

TNFRSF11A Protein Rat 重組大鼠 TNFRSF11A 蛋白 (Fc 標簽)

NT5C3A重組人 NT5C3 蛋白 Protein

小鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA pcr檢測試劑盒

Rat ai thyroid stimulating hormone receptor aibody (Ab) ELISA Kit 大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)試劑盒

Humancytokeratinfragmeaigen21-1,CYFRA21-1ELISAKit 人細胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)pcr檢測試劑盒分裝

HumanAlternativemacrophageactivation-associatedCCchemokine1,AmAC-1試劑盒人巨噬細胞替代激活相關化學因子1(AmAC-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物超氧化物歧化酶(SOD)亞型制備試劑盒50次

MonkeyIerleukin6,IL-6ELISAKit猴白介素6(IL-6)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔結腸黏膜上皮細胞大鼠內皮素1(EDN1)試劑盒 ，英文名： EDN1 ELISA Kit

Mouse nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH) ELISA Kit 小鼠腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)試劑盒

RatGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKit 大鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforGIPELISAKit大鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽

細胞脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量試劑盒20次

RatsolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)試劑盒規(guī)格：96T/48T

收到細胞如何處理？

1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。

2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作