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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:582
更新時間:2024-11-04
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:小鼠主動脈外膜成纖維細胞
組織來源:主動脈組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳1-2代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
小鼠主動脈外膜成纖維分離自主動脈血管外膜組織;血管外膜是由疏松結(jié)締組織組成,其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維。血管壁的結(jié)締組織細胞以成纖維細胞為主,當血管受損傷時,成纖維細胞具有修復(fù)外膜的能力。有的動脈中膜和外膜的交界處,有密集的彈性纖維組成的外彈性膜。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的血管外膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。血管外膜成纖維細胞是血管外膜的主要組成細胞之一,其主要生理功能合成和釋放細胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠主動脈外膜成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠主動脈外膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
鐵蛋白 英文名稱: human Ferritin 規(guī)格: 英文縮寫: Fe
成纖維細胞生長因子23 英文名稱: Human Fibroblast Growth Factor 23 規(guī)格: 英文縮寫: FGF-23
成纖維細胞生長因子2 英文名稱: Human Fibroblast Growth Factor 2 規(guī)格: 英文縮寫: FGF-2
人V抗原 英文名稱: Human Vcoagulation factor 5 Aigen 規(guī)格: 英文縮寫: F5-Ag
小鼠16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat thrombin activatable fibrinolysis inhibitor / thrombin activatable fibrinolysis inhibitor (TAFI)ELISA Kit 大鼠纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)試劑盒
HumanDopamineD1receptor,D1RELISAKit 人多巴胺D1受體(D1R)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCoxsackievirusIgG,CoxV-IgG試劑盒人柯薩奇病毒IgG(CoxV-IgG)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織C-MET激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanProteindisulfide-isomeraseprecursor,PDIELISAKit人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體(PDI)試劑盒規(guī)格:96T/48T
HRC蛋白抗體
干細胞生長因子抗體
CLEC5A重組大鼠 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 蛋白 Protein
CYP3A4(Cytochrome p450 3A4 0.5mgCYP3A4(Cytochrome p450 3A4) 細胞色素P450 3A4抗原
SNAP25重組人 SNAP25 / SUP 蛋白 Protein
IFNAR1 Protein Human 重組人 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (Fc 標簽)
CPA1 Protein Mouse 重組小鼠 Carboxypeptidase A1 / CPA1 蛋白
CYP3A4(Cytochrome p450 3A4 0.5mgCYP3A4(Cytochrome p450 3A4) 細胞色素P450 3A4抗原
IFNAR1 Protein Human 重組人 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (Fc 標簽)
CLEC5A重組大鼠 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 蛋白 Protein
CPA1 Protein Mouse 重組小鼠 Carboxypeptidase A1 / CPA1 蛋白
SNAP25重組人 SNAP25 / SUP 蛋白 Protein
小鼠主動脈外膜成纖維細胞大鼠雌二醇(E2)試劑盒 ,英文名: E2 ELISA Kit
Mouse 5 hydroxyyptamine (5-HT) ELISA Kit 小鼠5羥色胺(5-HT)試劑盒
ELISA 小鼠環(huán)0酸腺苷(mouse cAMP) 進口分裝
CLIAKitforLF/LTFELISAKit大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白
通用型HRP-AEC底物顯色試劑盒10次
ELISAKitMIP-1α/CCL3巨噬細胞性蛋白1α
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