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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
小鼠氣管上皮細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
小鼠氣管上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：有絲分裂細(xì)胞周期蛋白MPP9抗體 葡萄糖果糖還原酶2抗體 甲狀腺激素受體相互作用12抗體 小鼠軟骨細(xì)胞 大鼠胚胎成纖維細(xì)胞 脾細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合細(xì)胞;TE4 人肥大細(xì)胞；HMC-1
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：1127
更新時(shí)間：2024-11-04
產(chǎn)品特性Product characteristics
小鼠氣管上皮細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
氣管 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7012 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠氣管上皮分離自氣管組織；氣管（Trachea），呼吸器官的一部分；為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣，與環(huán)狀軟骨相連；向下至第四、五胸椎體（相當(dāng)胸骨角平面）交界處，分左、右主支氣管，分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個(gè)半環(huán)狀軟骨構(gòu)成，有彈性，軟骨為“C"字形的軟骨環(huán)，缺口向后，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接，保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜，表面覆蓋纖毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒，纖毛不斷向咽部擺動(dòng)將粘液與灰塵排出，以凈化吸入的氣體。氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的道防線，不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細(xì)胞，還作為效應(yīng)細(xì)胞合成、釋放多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子從而參與氣道炎癥及免疫反應(yīng)。體外培養(yǎng)的原代氣管上皮細(xì)胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上存在很大的相似性，因此，在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠氣管上皮采用-混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠氣管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 英文名稱： Angiotensin Conveing Enzyme 規(guī)格： 英文縮寫： ACE
膜聯(lián)蛋白2 英文名稱： Annexin 2 規(guī)格： 英文縮寫： ANXA-2
骨堿性0酸酶 英文名稱： bone alkaline phosphatase 規(guī)格： 英文縮寫： BALP
凋亡因子BAX 英文名稱： apoptogen BAX 規(guī)格： 英文縮寫： BAX
小鼠抑制素A(INH-A)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human granulysin (granulysin) ELISA Kit 人顆粒溶素(granulysin)試劑盒
HumanGasinELISAKit 人胃泌素(Gasin)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor6-K-PGELISAKit大鼠6同前列腺素
飲料D-蘋果酸比色法定量試劑盒20次
MousemammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit小鼠癌標(biāo)志物-CA153試劑盒規(guī)格：96T/48T
NACAD蛋白抗體
FITC標(biāo)記小鼠CD122單克隆抗體
CPM重組小鼠 Carboxypeptidase M / CPM 蛋白 Protein
β-血小板球蛋白(βTG)重組蛋白 Recombinant Beta-Thromboglobulin (bTG)
PRTFDC1重組人 PRTFDC1 蛋白 Protein
CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白
CD63 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白
肝脂酶(LIPC)重組蛋白 Recombinant Lipase, Hepatic (LIPC)
CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白
BGN重組小鼠 Biglycan / PG-S1 / BGN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
THPO Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白
PDHA1重組人 PDHA1 / C54G1 蛋白1 (aa 30-390) Protein
小鼠氣管上皮細(xì)胞大鼠復(fù)制蛋白A 70kDaDNA結(jié)合亞基(RPA1)試劑盒 ，英文名： RPA1 ELISA Kit
Porcine methemoglobin (MHB) ELISA Kit 豬高鐵血紅蛋白(MHB)試劑盒
轉(zhuǎn)基因植物Sad1基因核酸試劑盒 48T
CLIAKitforMBP(Mousemyelinbasicprotein)ELISAKit小鼠髓0脂堿性蛋白
體液氧化型(GSSG)濃度比色法定量試劑盒50次
ELISAKitLp-PL-A2脂蛋脂酶A2
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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