服務(wù)熱線
021-59989018
歡迎訪問(wèn)上海研生實(shí)業(yè)有限公司網(wǎng)站
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品型號(hào):
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問(wèn)量:715
更新時(shí)間:2024-11-05
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:大鼠尿道平滑肌細(xì)胞
組織來(lái)源:尿道
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠尿道平滑肌體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠尿道平滑肌分離自尿道管組織;尿道是從膀胱通向體外的管道。起自膀胱的尿道內(nèi)口,止于尿道外口,行程中通過(guò)前列腺部、膜部和陰莖海綿體部,尿道在尿道膜部有一環(huán)橫行紋肌構(gòu)成的括約肌,稱為尿道外括約肌,由意識(shí)控制。尿道有三個(gè)解剖上的較狹部和膨大部,前者分別位于外口、膜部和內(nèi)口,后者位于舟狀窩、球部和前列腺部。尿道壁為粘膜層、粘膜下層和肌肉層所組成。在前尿道的外面,還包有豐富的彈力纖維和平滑肌纖維的尿道海綿體。尿道粘膜上皮在前列腺部為移行上皮(近膀胱部),一部分為多列或復(fù)層柱狀上皮,在有尿道海綿體的一部分尿道,主要為復(fù)層柱狀上皮,在皺襞上也有單層柱狀上皮。特別在舟狀窩內(nèi)有許多環(huán)狀細(xì)胞,舟狀窩的遠(yuǎn)端部開始有未角化的復(fù)層鱗狀上皮。粘膜下層血液供應(yīng)豐富,主要為結(jié)締組織。肌肉層有縱行肌和外環(huán)形肌。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠尿道平滑肌采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過(guò)平滑肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠尿道平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠白介素-6(mouse IL-6) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠白介素-7(mouse IL-7) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠白介素-8(mouse IL-8) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠白介素-9(mouse IL-9) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human neurofilame protein (NF) ELISA Kit 人神經(jīng)絲蛋白(NF)試劑盒
HumanApolipoproteinH,apo-HELISAKit 人載脂蛋白H(Apo-H)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-IVIgGaibody試劑盒人抗IVIgG抗體試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物鎂ATP酶(Mg++-ATPase)活性比色法定量試劑盒20次
HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorC,VEGF-CELISAKit人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)試劑盒規(guī)格:96T/48T
4號(hào)染色體開放閱讀框51抗體
磷酸化神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白SCG10抗體
UCHL1重組大鼠 UCHL1 / PGP9.5 蛋白 Protein
HCV-NS4a 丙型肝病毒-NS4a(抗原 0.5mgHCV-NS4a 丙型肝病毒-NS4a(抗原)
SERPINA12重組人 Vaspin / SerpinA12 蛋白 Protein
EPHB3 Protein Human 重組人 EphB3 / HEK2 蛋白 (aa 585-998, His & GST 標(biāo)簽)
PGK1 Protein Mouse 重組小鼠 PGK1 / PGKA 蛋白
HCV-NS4a 丙型肝病毒-NS4a(抗原 0.5mgHCV-NS4a 丙型肝病毒-NS4a(抗原)
EPHB3 Protein Human 重組人 EphB3 / HEK2 蛋白 (aa 585-998, His & GST 標(biāo)簽)
UCHL1重組大鼠 UCHL1 / PGP9.5 蛋白 Protein
PGK1 Protein Mouse 重組小鼠 PGK1 / PGKA 蛋白
SERPINA12重組人 Vaspin / SerpinA12 蛋白 Protein
大鼠尿道平滑肌細(xì)胞大鼠白介素7(IL-7)試劑盒 ,英文名: IL-7 ELISA Kit
Mouse ierleukin 17 (IL-17) ELISA Kit 小鼠白介素17(IL-17)試劑盒
ELISA 小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子4(mouse GATA4) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIP-10/CXCL10ELISAKit大鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10
通用型脯(proline)含量比色法定量試劑盒20次
ELISAKiAES大鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子