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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
大鼠胚成纖維細胞
產(chǎn)品簡介：
大鼠胚成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品：金屬磷酸酯酶1抗體 D341Med(人髓母細胞瘤細胞) 兔前列腺上皮細胞 肝癌衍生生長因子相關(guān)蛋白3抗體 小鼠睪丸支持細胞 類固醇脫氫酶樣蛋白1抗體 人心肌成纖維細胞 磷酸化細胞分化周期蛋白37抗體
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：766
更新時間：2024-11-05
產(chǎn)品特性Product characteristics
大鼠胚成纖維細胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
胚胎 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8247 |
細胞簡介：
大鼠胚成纖維分離自胚胎；成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的胚胎成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細胞常用作ES細胞培養(yǎng)常用的飼養(yǎng)層細胞，能產(chǎn)生抑制ES細胞自主分化和促進ES細胞增殖的因子，故能有效地促進ES細胞的增殖并維持其未分化特性和多潛能性，且分泌效果優(yōu)于外源添加的一些因子，而且可以為ES細胞的培養(yǎng)提供類似于體內(nèi)的微環(huán)境，故在研究哺乳動物ES細胞中得到廣泛使用。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
實驗室分離的大鼠胚成纖維采用消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的大鼠胚成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
大鼠胚成纖維體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠雌激素(E)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1 (sPECAM-1/sCD31) ELISA Kit 大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)試劑盒
HumanureaserelatedproteinC,UreCELISAKit 人尿素酶相關(guān)蛋白C(UreC)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-insulieceptoraibody,AIRA試劑盒人抗胰島素受體抗體(AIRA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物莽草酸脫氫酶(shikimatedehydrogenase;SkDH)電泳分析試劑盒5次
HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAKit人血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)試劑盒規(guī)格：96T/48T
5-三磷酸肌醇受體3抗體
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體
B2M重組大鼠 B2M / Beta-2-microglobulin 蛋白 Protein
GSR/GRase(glutathione reductase 0.5mgGSR/GRase(glutathione reductase) 還原酶抗原
S100A10重組人 S100A10 蛋白 Protein
EPHB2 Protein Human 重組人 EphB2 / Hek5 蛋白 (aa 570-987, His & GST 標(biāo)簽)
UCHL1 Protein Mouse 重組小鼠 UCHL1 / PGP9.5 蛋白
GSR/GRase(glutathione reductase 0.5mgGSR/GRase(glutathione reductase) 還原酶抗原
EPHB2 Protein Human 重組人 EphB2 / Hek5 蛋白 (aa 570-987, His & GST 標(biāo)簽)
B2M重組大鼠 B2M / Beta-2-microglobulin 蛋白 Protein
UCHL1 Protein Mouse 重組小鼠 UCHL1 / PGP9.5 蛋白
S100A10重組人 S100A10 蛋白 Protein
大鼠胚成纖維細胞大鼠白介素6受體(IL-6R)試劑盒 ，英文名： IL-6R ELISA Kit
Mouse ierleukin 18 (IL-18) ELISA Kit 小鼠白介素18(IL-18)試劑盒
ELISA 小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(mouse HIF-1α) 進口分裝
CLIAKitforINS(MouseInsulin)ELISAKit小鼠胰島素
通用型腐霉屬種(Pythiumspecies)試劑盒20次
ELISAKitITGαM/CD11b大鼠整合素αM型
