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更新時間:2024-11-05
兔顳下頜關節(jié)軟骨細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
軟骨 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X8401 |
細胞簡介:
兔顳下頜關節(jié)軟骨分離自顳下頜關節(jié)軟骨組織,顳下頜關節(jié)又稱顳頜關節(jié)"或下頜關節(jié)"。由下頜頭與顳骨下頜窩和關節(jié)結節(jié)組成,左右合成一聯(lián)合關節(jié),主理張口閉口和咀嚼運動。關節(jié)囊松弛,側方為內(nèi)、外側韌帶所加強。囊內(nèi)的關節(jié)盤呈卵圓形,由纖維軟骨組成,區(qū)分為前、中、后三部分。上面呈鞍狀,前凹后凸,與關節(jié)結節(jié)和下頜窩的凸凹輪廓相對應;下面凹正對下頜頭,周緣與關節(jié)囊相接,前緣與穿過關節(jié)囊的翼外肌腱相連。關節(jié)盤將關節(jié)腔分成上、下兩半。關節(jié)外更有蝶下頜韌帶(蝶棘至下頜小舌)和莖突下頜韌帶(莖突至下頜角)予以加固。關節(jié)軟骨屬于透明軟骨,表面光滑、呈淡藍色、有光澤,它是由一種特殊的叫做致密結締組織的膠原纖維構成的基本框架,這種框架呈半環(huán)形,類似拱形球門,其底端緊緊附著在下面的骨質上,上端朝向關節(jié)面,這種結構使關節(jié)軟骨緊緊與骨結合起來而不會掉下來,同時當受到壓力時候,還可以有少許的變形,起到緩沖壓力的作用。在這些纖維之間,散在分布著軟骨細胞,軟骨細胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細胞組成,這些軟骨細胞維持關節(jié)軟骨的正常代謝。關節(jié)軟骨沒有神經(jīng)支配,也沒有血管,其營養(yǎng)成分必須從關節(jié)液中取得,而其代謝廢物也必須排至關節(jié)液中,關節(jié)軟骨的這種營養(yǎng)代謝必須通過關節(jié)運動,使關節(jié)軟骨不斷的受到壓力刺激才行,所以關節(jié)運動對于維持關節(jié)軟骨的正常結構起重要的作用。關節(jié)軟骨細胞位于關節(jié)軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的關節(jié)軟骨細胞位于關節(jié)軟骨組織的表層,單個分布、體積較小、呈橢圓形,長軸與關節(jié)軟骨表面平行,越向深層的關節(jié)軟骨細胞體積之間增大呈圓形,細胞核圓形或卵圓形、染色淺,細胞質弱嗜堿性,常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的關節(jié)軟骨細胞多2-8個成群分布于關節(jié)軟骨陷窩內(nèi),這些關節(jié)軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,關節(jié)軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中,關節(jié)軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的關節(jié)軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介:
實驗室分離的兔顳下頜關節(jié)軟骨采用膠原酶聯(lián)合消化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔顳下頜關節(jié)軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每3-4天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔顳下頜關節(jié)軟骨體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠抗中性??贵w試劑盒 小鼠抗中性粒抗體試劑盒 小鼠抗中性??贵w試劑盒,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抗中性粒抗體試劑盒、小鼠抗中性??贵w試劑盒
小鼠抗增殖細胞核抗原抗體試劑盒 小鼠抗增殖細胞核抗原抗體試劑盒 小鼠抗增殖細胞核抗原抗體試劑盒,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抗增殖細胞核抗原抗體試劑盒、小鼠抗增殖細胞核抗原抗體試劑盒
小鼠抗血小板抗體試劑盒 小鼠抗血小板抗體試劑盒 小鼠抗血小板抗體試劑盒,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抗血小板抗體試劑盒、小鼠抗血小板抗體試劑盒
小鼠抗心0脂抗體試劑盒 小鼠抗心0脂抗體試劑盒 小鼠抗心0脂抗體試劑盒,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抗心0脂抗體試劑盒、小鼠抗心0脂抗體試劑盒
線粒體核糖體蛋白L40抗體
G蛋白結合蛋白7抗體
FETUB重組小鼠 Fetuin-B / FETUB 蛋白 Protein
APC(Activated protein C 0.5mgAPC(Activated protein C) APC活化蛋白C抗原
FGFBP3重組人 FGFBP3 蛋白 Protein
CST1 Protein Human 重組人 Cystatin SN / CST1 蛋白
EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白
APC(Activated protein C 0.5mgAPC(Activated protein C) APC活化蛋白C抗原
CST1 Protein Human 重組人 Cystatin SN / CST1 蛋白
FETUB重組小鼠 Fetuin-B / FETUB 蛋白 Protein
EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白
FGFBP3重組人 FGFBP3 蛋白 Protein
小鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA pcr檢測試劑盒
Human caneous lymphocyte associated aigen (CLA) ELISA Kit 人皮膚淋巴細胞相關抗原(CLA)試劑盒
Humangasin-reliasingpeptide,GRPELISAKit 人胃泌素釋放多肽(GRP)pcr檢測試劑盒分裝
Human6-hydroxydopamine,6-OHDA試劑盒人6-羥多巴胺(6-OHDA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
正苯基萘胺攝入法細菌膜損傷熒光試劑盒20次
MouseAi-nuclearAibody,ANAELISAKit小鼠抗核抗體(ANA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔顳下頜關節(jié)軟骨細胞大鼠細胞胱硫醚γ裂解酶(CSE)試劑盒 ,英文名: CSE ELISA Kit
Mouse retinol binding protein (RBP) ELISA Kit 小鼠結合蛋白(RBP)試劑盒
MouseFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISAKit 小鼠第八因子相關抗原(FⅧAg)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforHSP-27(Humanheatshockprotein27)ELISAKit人熱休克蛋白27
細胞MEK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-15大鼠白介素15
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行