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產(chǎn)品型號:
廠商性質:經(jīng)銷商
訪問量:607
更新時間:2024-11-04
小鼠胰腺導管上皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
胰腺組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7074 |
細胞簡介:
小鼠胰腺導管上皮分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細胞組成:α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細胞分泌胰島素,降低血糖;γ細胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌;PP細胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。成體胰腺導管上皮細胞作為胰腺前體細胞,已證實具多向分化潛能,在合適的外源性刺激下可分化成胰島樣細胞,胰腺導管上皮細胞轉分化的胰島樣細胞免疫原性如何,轉分化的胰島樣細胞在治療糖尿病時是否發(fā)生免疫排斥反應,對干細胞臨床治療糖尿病具有重要意義。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠胰腺導管上皮采用-膠原酶混合消化法結合密度梯度離心法、差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠胰腺導管上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISAKit ELISA. 96T/48T
中文名稱 方法 規(guī)格
小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠C(VC)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human phosphatidylinositol specific phospholipase C (PIPLC) ELISA Kit 人0酯酰肌醇特異性0酯酶C(PIPLC)試劑盒
Human2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPGELISAKit 人2,3-二0酸甘油酸(2,3-DPG)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenLeukemiainhibitoryfactor,LIF試劑盒雞白血病抑制因子(LIF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞JNK/SAPK蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseGATAbindingprotein4,GATA4ELISAKit小鼠GATA結合蛋白4(GATA4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
FAM162A蛋白抗體
耳聾-甲狀腺腫綜合征相關COBL蛋白抗體
LYPD3重組小鼠 C4.4A / LYPD3 蛋白 Protein
Alpha-Synuclein 核突觸蛋白(抗原 0.5mgAlpha-Synuclein 核突觸蛋白(抗原)
NLK重組人 nemo-like kinase / NLK 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
CDON Protein Human 重組人 CDON / CDO 蛋白
ENPEP Protein Rat 重組大鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白 (aa 41-945, His 標簽)
半乳糖凝集素9(GAL9)重組蛋白 Recombinant Galectin 9 (GAL9)
CDON Protein Human 重組人 CDON / CDO 蛋白
EGFR重組小鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
IL2RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL2RA 蛋白
LYZL2重組人 Lysozyme 2 / LYZL2 蛋白 Protein
小鼠胰腺導管上皮細胞大鼠促腎上腺皮質素釋放激素結合蛋白(CRHBP)試劑盒 ,英文名: CRHBP ELISA Kit
P selectin (P-S 人P選擇素(P-S
Ratsolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 大鼠可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforCT-1ELISAKit大鼠心肌營養(yǎng)素1
細胞涂片巴氏(papanicolaou;PAP)染色試劑盒50次
RatEndomeiumAibody,EMAbELISAKit大鼠抗子宮內膜抗體(EMAb)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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